产品简介:
dapi染色液(dapi staining solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。dapi即2-(4-amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也称dapi dihydrochloride,分子式为c16h15n5•2hcl,mw为350.25,cas:28718-90-3。
dapi是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。和eb(ethidium bromide)相比,对双链dna的染色灵敏度要高很多倍,dapi和双链dna结合后可以产生比dapi自身强20多倍的荧光。dapi染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。dapi也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链dna染色。dapi的*大激发波长为340nm,*大发射波长为488nm;dapi和双链dna结合后,*大激发波长为364nm,*大发射波长为454nm。dapi的发射光为蓝色,且dapi和绿色荧光蛋白gfp或texas red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
本dapi染色液为即用型,浓度为10ug/ml,可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。
使用方法:
1、对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行dapi染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的dapi染色。
2、对于贴壁细胞或组织切片,加入少量dapi染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。
3、室温放置3-5分钟。
4、吸除dapi染色液,用tbst、pbs或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
1、本dapi染色液的浓度经过优化,确保可以满足各种常规染色的需要。
2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、dapi对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
保存条件:
-20℃避光保存,一年有效。
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