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如从培养的植物细胞中提取*组dna,请离心收集2×103~1×107的培养植物细胞,加入150 μl水充分悬浮细胞后移入研钵中,加入液氮后快速、用力研磨至粉末状。注)样品研磨应充分,否则将会严重影响*组dna的收率。② 将研钵移至65℃水浴,当样品粉末刚开始融化时,连云港检测*盒,向研钵中加入700 μl的solution a和1.2 μl的rnase a1,用力碾磨30秒。③ 收集650 μl研磨好的组织匀浆移至collection tube中。如匀浆体积不足650 μl,请补充solution a至650 μl。65℃保温15分钟。注)处理富含纤维的根/茎等植物材料或富含淀粉、蛋白质的种子等时,可延长水浴时间至60分钟。
做好对照正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊、兔或bsa等封闭。实验条件的选择在elisa中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚、聚、聚丙酰胺和纤维素等。
使用研磨棒进行匀浆时:① 取1~100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的collection tube 中,用研磨棒快速研磨成糊状。② 加入350 μl的solution a和0.9 μl的rnase a1后用研磨棒快速研磨成匀浆。③ 加入350 μl的solution a将研磨棒上的匀浆冲入collection tube中,ros检测*盒,充分振荡混合后,65℃保温5分钟。【从植物材料或植物培养细胞中提取*组dna】① 按下表称取适量的新鲜植物材料(如选用的是冷冻干燥植物材料,生化检测*盒,则用量减半),剪成小块放入研钵中,加入液氮,待样品冷冻完全后快速、用力研磨至粉末状。
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